斑馬魚(yú)基因敲降思路

基因敲降項目的一般工作思路：1）首先分析目標基因在斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育早期是否有表達（如果沒(méi)有表達，則根本不存在敲降問(wèn)題）。2）設計并安排實(shí)驗（RT-PCR）檢測目標基因在胚胎發(fā)育早期的表達情況（目的在于確認目標基因在胚胎發(fā)育早期有表達，同時(shí)在有表達的情況下建立檢測目標基因表達下調的檢測方法）。實(shí)際上，即使數據庫中有描述該基因在胚胎發(fā)育早期有表達，也要開(kāi)展此項實(shí)驗。3）在確認該基因在胚胎發(fā)育早期有表達的

斑馬魚(yú)敲降CRISPRi法與MO（嗎啡啉）法比較

一、基因敲降的前期準備工作相同1.1?生物信息學(xué)分析目標基因在斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)送過(guò)程中是否有表達。1.2?收集斑馬魚(yú)早期發(fā)育胚胎（通常為48?hpf?前的胚胎），提取總RNA，然后進(jìn)行體外轉錄（RT）。1.3?設計檢測目標基因表達的PCR?引物，以1.2獲得的cDNA?為模板，進(jìn)行PCR?擴增，確認目標基因在早期有表達。二、MO法與CRISPRi法的敲降原理不同2.1?MO?是在轉錄后水平上敲降基

斑馬魚(yú)敲降CRISPRi法與MO（嗎啡啉）法比較

一、基因敲降的前期準備工作相同1.1?生物信息學(xué)分析目標基因在斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)送過(guò)程中是否有表達。1.2?收集斑馬魚(yú)早期發(fā)育胚胎（通常為48?hpf?前的胚胎），提取總RNA，然后進(jìn)行體外轉錄（RT）。1.3?設計檢測目標基因表達的PCR?引物，以1.2獲得的cDNA?為模板，進(jìn)行PCR?擴增，確認目標基因在早期有表達。二、MO法與CRISPRi法的敲降原理不同2.1?MO?是在轉錄后水平上敲降基