基于sgRNA的相關(guān)問(wèn)題討論

1、Q:請教老師，我設計的sgRNA?與非靶序列相似度多大時(shí)會(huì )把這個(gè)非靶標基因也編輯了？是否可以理解為：在遠離pam端有4個(gè)及以?xún)鹊呐c靶序列不同堿基的序列都是可以被編輯的。即脫靶到了那些序列。A:有脫靶機會(huì )，但通常識別活性會(huì )比較低，一般地，脫靶是需要盡量避免的。如果想要敲除兩個(gè)以上基因，需要針對要敲除的基因分別設計crispr以制備不同的sgRNA。?2.Q:crispr/Cas13在gRNA設計

基因編輯質(zhì)粒的相關(guān)問(wèn)題討論-南京堯順禹斑馬魚(yú)基因編輯

基于基因編輯質(zhì)粒的相關(guān)問(wèn)題討論1、Q:利用crsipr敲除，可以用瞬轉質(zhì)粒嘛？A:可以！這樣做得到的細胞是mosaic，即有的細胞是基因組編輯了，有的則沒(méi)有；有的細胞基因敲除了，有點(diǎn)則沒(méi)有。如果只要改變部分細胞基因即可的話(huà)，則可以通過(guò)瞬轉，如以原代細胞為研究對象。?2、Q:保存領(lǐng)到的質(zhì)粒和菌液，說(shuō)明書(shū)上說(shuō)質(zhì)粒保存溫度-20℃/-80℃，怎么決定？我把領(lǐng)到的裝質(zhì)粒和菌液的離心管插到一個(gè)管插上直接放進(jìn)

斑馬魚(yú)模型在化妝品研究中的運用（南京堯順禹基因編輯斑馬魚(yú)模型、毒理研究）

化妝品已成為人們生活中的必需品，安全性和功效性評價(jià)是化妝品研發(fā)過(guò)程中非常重要的一個(gè)環(huán)節。斑馬魚(yú)具有傳代時(shí)間短、飼養方便、價(jià)格低廉以及便于大規模篩選等優(yōu)勢，是一種有效、可靠、高通量的模式生物。目前，對斑馬魚(yú)致死和致畸的統計結果可用于化妝品原料的安全性評價(jià)和防曬劑抗紫外線(xiàn)的功效評價(jià)，其身體表面黑色素數量的變化可用于斑類(lèi)白原料的功效評價(jià)，均呈現出良好的發(fā)展優(yōu)勢和應用前景。用斑馬魚(yú)評價(jià)化學(xué)品等健康安全的實(shí)